最好事先规划一下路线，集中在几个主题上。这里的展厅主要包括：八角庭院、动物雕塑馆、缪斯厅、圆形大厅、马车厅、烛台陈列廊、壁毯陈列廊厅、地图陈列廊、圣母怀胎廊厅、拉斐尔画室、博尔戈大火厅、西斯廷教堂、梵蒂冈图书馆和画廊。
梵蒂冈博物馆是西欧收费最贵的博物馆之一，而且开馆时间极短——当地时间13：30就闭馆了。每个月末的周日，梵蒂冈博物馆免票，可以节省下来十几欧元，于是很多游客会选择这一天排队进馆。
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